Proces odebírání a mrazení reprodukčních buněk

Buňky určené pro léčbu neplodnosti (vajíčko + spermie = embryo) se uchovávají i přepravují zmrazené.

Samotné vzorky jsou kryokonzervovány ve speciálních zkumavkách a pejetách určených právě k těmto účelům.

Tradiční, tzv. pomalé zamrazení je starší kryokonzervační metoda, při které dochází k řízenému růstu ledových krystalků mimo buňku a následně pomalému snižování teploty. Při pomalém zamrazení jsou buňky dehydratovány vystavením jednomu nebo více kryokonzervačním roztokům po dobu 10-15 minut. Buňky se poté vloží do zkumavky, která se tepelně uzavře a umístí do mrazicího zařízení, kde pomalu klesá teplota na -30 ° C.

Pomalé zmrazování, které bylo poprvé použito v roce 1986, bylo dříve jediným spolehlivým způsobem, jak zamrazit buňky, než došlo k průlomu v oblasti kryokonzervace metodou vitrifikace. Vitrifikace (z latinského vitreum, "sklo") je metoda ultra-rychlého ochlazování za použití média s vysokou dávkou kryoprotektivních látek, které chrání reprodukční buňky před poškozením. Rychlé ochlazování vede k přeměně látky na "sklo", což je nekrystalická amorfní pevná látka. Bez krystalků ledu ztuhnou nejen buňky, ale i celý roztok.

Při vitrifikaci embryo nebo buňka přechází z 37 na -196 ° C během <1 s, což má za následek extrémně rychlé chlazení. Vysoká rychlost ochlazování umožňuje, aby se obsah pipety proměnil spíše v látku podobnou sklu než ledu. Vyhnout se tvorbě ledových krystalů je v procesu zmrazování zásadní a zvyšuje významně míru přežití buněk po rozmrazení.

EMBRYA

Embryo je zárodek mezi prvním a osmým týdnem vlastního vývoje od početí. Do těla budoucí maminky je nejčastěji transferováno pátý den svého vývoje, tedy ve fázi blastocysty. Nosičem embryí jsou slámky (tzv. pejety), které nesou jedno až dvě embrya. Ve stejném stádiu růstu se nejkvalitnější embrya pomocí vitrifikace zmrazují pro případné další použití.

Důvody pro zmrazení embryí:

Pokud se nevydaří první pokus IVF, budete mít díky zmrazení embryí "po ruce" další zdravé embryo pro příští pokus bez nutnosti podstupovat další stimulaci pro odběr vajíček.
Pokud plánujete další dítě, je velmi vhodné uchování "sourozeneckého" embrya.

VAJÍČKA (OOCYTY)

Vajíčka se vitrifikují v průběhu několika hodin po odebrání (mohou nějaký čas dozrávat ve speciálním inkubátoru). Odběr vajíček se provádí punkcí (vpichem jehly do těla) pod řízenou ultrazvukovou kontrolou, při které jsou dozrálá vajíčka nasátá do pejety. To, že je k odběru více vajíček, je výsledkem stimulace ženy hormony, aby došlo k dozrání několika vajíček současně a bylo tak možné získat více kvalitních embryí, která se zmrazí pro případnou další léčbu.

Důvody pro zmrazení vajíček:

Pokud ženě hrozí, že by mohla projít ztrátou plodnosti (např. pokud má podstoupit chemoterapii, či jinak razantní léčbu, která má vliv na plodnost), je velmi vhodné vajíčka zmrazit pro zachování plodnosti.
Nebylo možné vajíčka po jejich punkci ihned oplodnit (odběr spermií se nezdařil, partner se nemohl ze závažných důvodů dostavit k odběru vzorku) a jejich zmrazení umožní uchování pro pozdější použití k léčbě bez nutnosti další stimulace a odběru.
Tak zvaný "social freezing". Osvěta ohledně neplodnosti je mezi mladší generací již významná a ženy si uvědomují, že plánovaní rodiny moderní společnost odkládá až do věku, kdy již plodnost může být ohrožena. Zmrazení kvalitních zdravých vajíček v nejpříznivějším reprodukčním věku ověří stav plodnosti a zajistí její zachování.

SPERMIE

Spermie mohou být odebrány dvěma způsoby - přirozenou cestou (za pomoci masturbace), nebo chirurgicky přímo z varlat (metody TESE/MESA), které se používají při absenci spermií v ejakulátu. Po odebrání se spermie mrazí v průběhu několika hodin pomalým mrazením a jejich nosičem bývají kryozkumavky nebo pejety, které mají o něco menší průměr než pejety pro embrya.

Důvody pro zmrazení spermií:

Pokud muži hrozí, že by mohl projít ztrátou plodnosti (např. pokud má podstoupit chemoterapii, či jinak razantní léčbu, která má vliv na plodnost), je velmi vhodné spermie zmrazit pro zachování plodnosti.
Nebude možná přítomnost partnera v den punkce vajíček ženy a pro oplození se použije vzorek již dříve zmrazeného spermatu.
Tak zvaný "social freezing". I muži si čím dál více uvědomují, že plánovaní rodiny moderní společnost odkládá až do věku, kdy již plodnost může být ohrožena. Zmrazení kvalitních zdravých spermií v nejpříznivějším reprodukčním věku ověří stav plodnosti a zajistí její zachování.